Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit
Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit
Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit
Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit

1 / 1

Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit

Ontvang de meest recente Prijs
Stuur een aanvraag
Model No. : 10381
Brand Name : HEERLIJKHEID
10yrs

Hangzhou, Zhejiang, China

Bezoek de winkel
  • Platformcertificering

Product beschrijving

Menselijke collageen Typ Ⅱ (COL2) ELISA-Kit
VOOR GEBRUIK IN ONDERZOEK ALLEEN. Niet voor klinische diagnose gebruik
WINKEL #: 10381
INLEIDING
 Voor de kwantitatieve bepaling van menselijke COL2 concentraties.
 Detectie van soorten: menselijke
 Detectie gemiddeld: serum, plasma, weefsel homogenates, cel cultuur supernates.

PRINCIPE VAN TEST
De kit is voor het kwantitatieve niveau van COL2 in de steekproef, nemen gezuiverde menselijke COL2 om jas microtiterplaat plaat, maak solid-phase antilichaam, dan monsters of normen toevoegen aan putjes met een gelabeld antilichaam specifiek voor COL2, dan toevoegen van gelabelde HRP naar de waterput. Na wassen volledig, TMB substraat oplossing toevoegt, TMB substraat wordt blauwe kleur in putjes waarin antilichaam - antigeen - enzym-antilichaam complex, reactie wordt beëindigd door de toevoeging van een stop-oplossing en de kleurverandering wordt gemeten bij een golflengte van 450 nm. De concentratie van COL2 in de monsters wordt vervolgens bepaald door vergelijking van de OD van de monsters op de standaard curve.

SAMENSTELLING VAN DE KIT
Reagens hoeveelheid
Microelisa Stripplate 12well × 8strips
Standaard: 27 pg/ml 1 × 0. 5ml
Norm verdunningsmiddel 1 × 1. 5ml
HRP-Conjugate reagens 1 × 6 ml
Monster verdunningsmiddel 1 × 6 ml
Chromogeen oplossing per 1 × 6 ml
Chromogeen oplossing B 1 × 6 ml
Stop oplossing 1 × 6 ml
Wassen oplossing 1 × 20 ml × 30 vouwen
Gebruiker handmatige 1
Klevende Strip 2
Verzegelde tas 1

OPSLAGCONDITIES
 De ongeopende kit worden opgeslagen op [2-8 ℃].
 Voor geopende kit kan worden achtergelaten bij [2-8 ℃] voor maximaal 1 maand. Zoniet worden gebruikt onlangs, de standaard in-20 ℃ moet worden gehouden.

WASSEN METHODE
 Handmatig wassen methode: schudden weg de bleef vloeistof in het enzym platen; plaats sommige bibulous papieren op het test-bed, en de platen op de kop naar beneden sterk flap. Injecteren van ten minste 0.35 ml na verdunning wassen oplossing in de put, en marineer 1 ~ 2 minuten. Herhaal dit proces volgens uw vereisten.
 Automatisch wassen methode: als er automatische wasmachine, het mag alleen worden gebruikt in de test wanneer u vrij vertrouwd met zijn functie en prestaties bent.


BEREIDING VAN DE MONSTERS
1. serum-stolling bij kamertemperatuur gedurende 10-20 minuten, centrifuge met de snelheid van 2000-3000 rpm voor 20-min. verwijderen bovendrijvende vloeistof, centrifugeer als neerslag verscheen, nogmaals.
2. plasma-gebruik geschikt EDTA of citraat plasma als een antistollingsmiddel, centrifuge met de snelheid van 2000-3000 rpm voor 20-min. verwijderen bovendrijvende vloeistof, als neerslag verscheen, Centrifugeer nogmaals.
3. de celcultuur supernatans-Detect secretoire componenten, deeltjes te verwijderen door middel van centrifugeren voor 20-min met de snelheid van 2000-3000 rpm. Verwijderen supernatant detecteren de samenstelling van cellen, verdunde celsuspensie met PBS (PH7.2-7.4) te maken cel concentratie 1 miljoen / ml, herhaalde cycli bevriezen-ontdooien, beschadigen cellen en vrijgeven van intracellulaire componenten, centrifugeren 20-min met de snelheid van 2000-3000 rpm. Verwijder bovendrijvende vloeistof, als neerslag, centrifugaal weer verscheen.
4. weefselsteekproeven homogenates-na snijden, check het gewicht, Pipetteer PBS (PH7.2-7.4), bevroren met vloeibare stikstof, handhaven monsters bij 2-8℃ na het smelten. Pipetteer PBS (PH7.4), met de hand gehomogeniseerd of slijpmachines, centrifugeren 20-min met de snelheid van 2000-3000 rpm. Verwijder de bovendrijvende vloeistof.
5. extract zo spoedig mogelijk na het verzamelen van monsters, en zo spoedig mogelijk na de extractie moet worden getest. Als niet, monsters kunnen worden bewaard in -20 ℃.Avoid herhaalde cycli bevriezen-ontdooien.
6. niet speurder de monsters die NaN3 bevatten, want NaN3 HRP activiteit remt.


TEST PROCEDURE
Stap 1: Standaard: Breng alle reagentia op kamertemperatuur.
Verdun de standaard: Pipetteer 50μl standaard verdunning in elke buis. Pipetteer 100μl standaard (27 pg/ml) in de eerste buis. En neem uit 100μl uit de eerste buis in de tweede. Pipetteer 50μl uit de tweede buis aan de derde buis en produceren verdunningsreeks zoals hieronder. Elk van de concentratie te krijgen van de gemiddelde waarde van elk putje herhalen


Buis 0 1 2 3 4 5
PG/ml 27 18 12 6 3 1.5

Stap 2: Voorbereiden monster: lege wells afzonderlijk instellen (lege vergelijking putten niet toevoegen monster en reagens HRP-Conjugate, andere elke stap bewerking is hetzelfde). Pipetteer monster verdunning 40μl te testen van voorbeeld goed, dan toevoegen van testen monster 10μl (laatste monsterverdunning is vijfvoudige), Pipetteer monster te putten, niet aanraken de goed muur zoveel mogelijk, en meng zachtjes.
Stap 3: Incubeer: Bedek met de klevende strip voorwaarde, Incubeer gedurende 30 minuten bij 37℃.
Stap 4: Configureren vloeistof: Verdun wassen oplossing 30-fold (of 20-fold) met gedestilleerd water.
Stap 5: Wassen: ontdekken de klevende strip, negeren vloeistof, Pipetteer wassen buffer aan elk putje, nog steeds voor 30s dan afvoer, herhaal 5 keer.
Stap 6: Voeg enzym: Pipetteer HRP-Conjugate reagens 50μl aan elk putje, behalve lege goed.
Stap 7: Incubeer: operatie met 3.
Stap 8: Wassen: operatie met 5.
Stap 9: Kleur: Pipetteer chromogeen oplossing A 50ul en chromogeen oplossing B aan elk putje, te voorkomen dat het licht behoud gedurende 15 minuten op 37℃
Stap 10: Zet de reactie Stop: Pipetteer stoppen oplossing 50μl aan elk putje, Stop de reactie (de blauwe wijzigen naar geel).
Stap 11: Berekenen: nemen goed als nul, leeg Lees de absorptie bij 450nm na Pipetteing stoppen oplossing binnen 15min.
BEREKENING VAN HET RESULTAAT
Neem de standaard concentratie als het horizontale vlak, de OD waarde voor de verticale, trekken de standaard curve op grafiek papier, ontdek de concentratie die overeenkomt met volgens de OD-waarde van monster door het monster curve, vermenigvuldigd met de verdunning meerdere, of de regressievergelijking rechte lijn van de standaard curve met de standaard concentratie en de OD-waarde, met de monster OD-waarde in de vergelijking berekenen, bereken de concentratie van het monster, vermenigvuldigd met de verdunningsfactor, het resultaat is de feitelijke concentratie van monster.
Grafische weergave als volgt:


BESCHRIJVING
1. de standaard curve is getrokken onder ideale omstandigheden, en is alleen voor referentie in plaats van het werkelijke standaard curve diagram van de kit.
2. het is aan te raden om juiste assay gegevens en standaard curve volgens de respectieve laboratoriumomstandigheden.

REGISTRATIEBEREIK
Detectiebereik van de kit is: 0.5 pg/ml-20pg/ml
VERVALDATUM
Twaalf maanden [Zie etiket op de buitenste verpakking voor de specifieke datum].

AANDACHT
 De kit neemt uit van de koeling moeten worden afgewogen 15-30 minuten in de kamer temperatuur, als de gecoate ELISA platen hebben niet opgebruikt na opening, de plaat moet worden opgeslagen in verzegelde zak.
 Wassen buffer zal kristallisatie scheiding, het verwarmd kan worden in water te ontbinden.
 Pipetteer monster met pipettors elke stap, en lees de juistheid ervan vaak om te voorkomen dat de experimentele fout. Pipetteer monster binnen 5 min, als het aantal monster is groot, adviseren gebruikend meerkanaals pipet.
 Als buitensporig hoog (de monster OD is hoger dan de eerste standaard goed), is de testen materiële concentratie verdund gelieve het monster (n-voudige).
 Klevende Strip enige grenzen de wegwerp gebruiken om kruisbesmetting te voorkomen.
 Het substraat moet onttrekken aan het licht te worden bewaard.
 Gelieve te verwijzen naar de instructie user strikt, de test resultaat bepaling moet nemen de microtiterplaat-afleesapparaat als een standaard.
 De voorbereiding van de monsters en alle de reagentia moet verwijzen naar besmettelijk materiële proces.
 Meng geen reagentia met die van andere partijen.


Stuur een aanvraag

Productalert

Abonneer u op uw geïnteresseerde zoekwoorden. We sturen de nieuwste en heetste producten vrij naar uw inbox. Mis geen handelsinformatie.